细胞冻存液的成分比例?
发布日期：2023-02-14 09:55:24
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细胞冻存液的成分比例?
细胞系的细胞类型和个体特征。不同的细胞有不同的冷冻条件，需要参考手册和文献。DMSO是一类具有代表性的渗透细细胞冻存液，包括甘油、DMSO、乙烯醇和乙酰胺。如果低温保存后发现细胞状态较差，则需要检查条件本身，或考虑污染和培养条件。DMSO在4℃时对细胞无明显毒性，分子量小，溶解度大，容易穿透细胞膜，降低细胞外未冻溶液中溶质的浓度，使细胞免受高浓度溶质的破坏，细胞内的水不会过度外渗，避免细胞过度脱水收缩;DMSO与水分子结合，可以降低冰点，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶损伤。
FBS: DMSO不一定是9:1，这种方式太多了，FBS很贵，一般必须用，除非是有价值的淋巴细胞等。一般*介质(含10-20%FBS)与DMSO按一定比例冷冻，如9:1或95:5，有一定偏差是可以接受的。此外，有些细胞在培养时没有血清，无法添加血清。本实验中，在无血清培养基(根据细胞特性定制的培养基)中加入5-10%的DMSO进行冷冻储存。冷冻的标准程序是冷却速率为-1 ~ -2℃/min。当温度达到-25℃以下时，可提高至-5℃~ -10℃/min;-100℃时可迅速浸入液氮中。也可以将冷冻保存的细胞管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱过夜。细胞冻存液的试管可以取出并移动到液氮容器中。
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