生物冷冻保存技术有哪些?

发布日期:2022-04-14 09:55:39

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生物冷冻保存是指在超低温条件下对细胞和组织实现长期保存。在冷冻保存过程中,细胞或组织的温度降至零度以下,其生物活性急剧减慢甚至完全停止。理想情况下,冻存之后复苏的细胞可恢复其冻存前的生物活性。

目前生物冷冻保存技术分为程序化慢冻和玻璃化冻存2种方式。

慢速降温法主要是通过控制细胞或组织的冷冻速率,使细胞内的水逐渐脱离细胞,以减少细胞内冰晶的形成。通常采用“两步法”:首先将细胞或组织缓慢降温至结晶温度以下(-80℃或-196℃),降温速率要保持在-3℃/min以内;然后将冷冻的生物样品转移到液氮罐里( -196℃)进行深低温的长期保存。这种冷冻保存技术的缺陷在于很难完全避免冰晶形成、渗透压失衡,从而造成生物样本损伤。

玻璃化冻存就是用高浓度的冷冻保护剂组合成玻璃化冻存液,通过与水分子发生强烈的水合作用,增加溶液黏性,以超高冷却速率降温,将细胞或组织直接浸入液氮( -196℃)或液氮蒸汽( -160℃)中,从而降低冰晶形成速度,保护样本。但是这种冷冻保存技术需要使用高浓度的冷冻保护剂,目前使用较广泛的冷冻保护剂有二甲基亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇、乙二醇、蔗糖、海藻糖、甘露糖醇等。这些冷冻保护剂往往具有一定的细胞毒性,易造成细胞功能损伤。

因此,研发安全型的仿生冷冻保护剂成为行业的必然发展趋势。君创永晟研发的无DMSO安全型仿生控冰冷冻保存试剂,在保证细胞冻存复苏后高存活率的前提下,显著提高了细胞冻存复苏后的存活质量,有效降低了生物样本冻存的安全风险,并且能够避免“玻璃化”冻存液因含有大量DMSO而导致的混合放热而损伤细胞的问题,还可以实现室温加入,简化操作流程。


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